Набор реактивов ОТ-M-MuLV-RH

Набор реактивов ОТ M-MuLV –RH представляет собой полную систему для эффективного синтеза первой цепи кДНК с мРНК или суммарной РНК матриц. M-MuLV –RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от M-MuLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. M-MuLV –RH ревертаза проявляет оптимальную активность при 42 °С (активена до 50 °С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 7 т.о. и включать модифицированные основания.
Набор содержит два типа буфера на основе KCl и (NH₄)₂SO₄, оптимизированные для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с любых матриц РНК, в том числе содержащих участки повышенной сложности (сильно структурированные или GC-богатые).
Входящие в набор, олиго(dT)₁₆ праймер и случайный гексапраймер позволяют более нацелено подходить к обратной транскрипции интересующих типов или участков РНК. Случайный гексапраймер неспецифически связывается с РНК матрицей и используется для синтеза кДНК со всех типов РНК в суммарной РНК. Олиго(dT)₁₆ праймер селективно отжигается на 3’-поли(А) концах РНК, обеспечивая синтез кДНК только с мРНК содержащих поли(А) конец.
Область применения:

• Синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени
• Синтез кДНК для клонирования
• Получение меченых кДНК зондов для микрочипов
• Мечение ДНК

Свойства M-MuLV –RH ревертазы

• Осуществляет синтез комплементарной цепи ДНК на РНК-матрице (РНК зависимая ДНК полимераза).
• Не обладает активностью РНКазы H.
• Позволяет синтезировать фрагменты кДНК длиной до 7 т.о.
• Обеспечивает высокий выход кДНК: при использовании 100 ед. акт. фермента на 1 мкг РНК выход реакции составляет не менее 100 нг первой цепи кДНК.
• Обладает повышенной термостабильностью

Хранение: при -20°С – 1 год; не более 30 циклов замораживания-размораживания.
Транспортировка: при 0 - +4 °С.