БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×)
Описание
Набор БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×) содержит 2× реакционную смесь БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×), 50 мМ раствор MgCl2 и стерильную воду. 2× реакционная смесь БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×) предназначена для проведения количественного ПЦР в режиме реального времени с использованием флуоресцентного красителя SYBR Green I на амплификаторах, поддерживающих нормализацию данных по флуоресцентному красителю ROX. В состав БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×) входят все необходимые компоненты ПЦР (исключая ДНК-матрицу и праймеры): высокопроцессивная рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза, N-урацил-ДНК-гликозилаза, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, ПЦР-буфер Mg2+, SYBR Green I, флуоресцентный краситель ROX, инертный краситель.Смесь оптимизирована для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с образцами геномной, плазмидной и вирусной ДНК. БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×) реакционная смесь содержит вещества, влияющие на температуры отжига праймеров и характеристики плавления матрицы, что позволяет повысить специфичность ПЦР и использовать матрицы со сложной пространственной структурой.
N-урацил-ДНК-гликозилаза (УДГ) и дУТФ (в пропорции с дТТФ) обеспечивают надежную защиту от переноса ампликона между реакционными смесями (кросс-контаминации). ДНК-полимераза, входящая в состав БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×), неактивна при комнатной температуре. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при 95 °С в течение 5 мин.
Инертный краситель в составе БиоМастер UDG HS-qPCR Lo-ROX SYBR (2×) окрашивает её в голубой цвет и облегчает контроль за раскапыванием смеси при использовании многолуночных планшетов.
Смесь идеально подходит для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Life Technologies (ABI) 7500, 7500 Fast, ViiA 7, QuantStudio 12K; Stratagene Mx4000, Mx3005P, Mx3000P.
Свойства реакционной смеси
- Реакционная смесь неактивна при комнатной температуре благодаря технологии “горячий” старт и активируется после инкубации при 95 °С в течение 5 мин.
- Позволяет проводить нормировку по флуоресцентному красителю ROX.
- Присутствие дУТФ гарантирует встраивание уридина в каждую синтезированную цепь ДНК. УДГ способна удалять урацил из одно- и двух-цепочечных молекул ДНК.
- Смесь оптимизирована для специфичной работы HS-Taq ДНК-полимеразы, длительного хранения (хранение БиоМастер U DG HS-qPCR SYBR Blue (2×) в течение 7 дней при комнатной температуре не снижает эффективность ПЦР), многократного замораживания-размораживания.
Преимущества использования
- Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
- Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
- Смесь окрашена для облегчения раскапывания.
- Сокращается время на подготовку реакции.
- Снижается вероятность контаминации и ошибки при смешивании компонентов ПЦР.
- Возможность нормировки данных.
- Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).