Отзывы
Оба продукта очень хорошо себя показали в работе.
S-8055 ДНК маркер «Step50» plus зарекомендовал себя хорошо, отлично разгоняется, четкие полосы, экономно расходуется.
Набор DU для выделения геномной ДНК из клеток, тканей и крови тоже сработал быстро и качественно!
1. Набор D-Tissues для выделения ДНК из тканей животных
Мы проводили выделения из различных спиртовых фиксаций животных с разным сроком фиксации, объем ткани для выделения каждый раз несколько отличался, так как не всегда была возможность его адекватно взвесить из-за наличия в образце не только мягких тканей (чешуйки, кости, кутикула насекомых, перисарк книдарий). Выделение проводилось согласно предоставленному протоколу, лизис тканей проводился при температуре 56°С в течение 2 часов с периодическим перемешиванием. Измерение концентрации полученной ДНК проводилось непосредственно после выделения с помощью спектрофотометра Allsheng Nano 500.
1) Итальянская стенная ящерица, Podarcis siculus (Северный Кавказ), палец, фиксация в 96% спирту, хранение в течение 2-3 месяцев при комнатной температуре. Концентрация полученной ДНК 6,93 нг/мкл;
2) Полевка, вид неизвестен, (Нарьян-мар), участок мышцы задней ноги, фиксация в 96% спирту, хранение в течение 2 месяцев при -80°С. Концентрация полученной ДНК – 194,04 нг/мкл;
3) Сидячая медуза Haliclystus auricula (Белое море), целиком, фиксация в 70% спирту, хранение в течение года при +4°С. Концентрация полученной ДНК 60,87 нг/мкл;
4) Немертина Cyanophthalma obscura (Финский залив), целиком, фиксация в 96% спирту, хранение в течение двух дней при +4°С. Концентрация полученной ДНК 14,21 нг/мкл;
5) Колония гидроидных полипов Cordylophora caspia (Финский залив), целиком, фиксация в 96% спирту, хранение в течение двух дней при +4°С. Концентрация полученной ДНК 16,73 нг/мкл.
Для трех последних образцов получены последовательности участка 1 субьединицы цитохромкосидазы HCO2198/LCO1490 длинной 650-700 п.н. с удовлетворительным качеством сиквенсов.
2. БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2×)
ПЦР проводили с образцами комаров рода Aedes (плато Путорана) со стандартными праймерами к участку 1 субьединицы цитохромкосидазы HCO2198/LCO1490 и губками рода Sycon со специфическими праймерами к участку 28S.
Обозначения: LD – маркер длин ДНК, AG1-20 – образцы комаров, S13-S17 – образцы губок, K- отрицательный контроль.
3. Набор для выделения ДНК из FFPE образцов тканей
Проводили выделения из различных музейных образцов животных, использовались участки мягких тканей, или животное целиком. Перед лизисом ткани дополнительно гомогенизировались с помощью пестика.
1) Гидроидная медуза Tiaropsis sp. (Баренцево море), фиксация в 4% параформальдегиде на фосфатном буфере, дальнейшее хранение в течение 2 лет при +4°С. Концентрация полученной ДНК – 74,40 нг/мкл.
2) Погонофора Galathealinum sp. (Карское море), фиксация в 10% формалине, хранение в течение 4 лет при комнатной температуре. Концентрация полученной ДНК – 69,07 нг/мкл.
3) Погонофора Siboglinium sp. (Карское море), фиксация в 10% формалине, хранение в течение 4 лет при комнатной температуре. Концентрация полученной ДНК – 5,2 нг/мкл.
4. Фьюжн 2.0 полимераза
ПЦР проводили с образцами, выделенными с помощью Набора для выделения ДНК из FFPE образцов тканей (пр. пункт), а также с помощью набора D-Tissues для выделения ДНК из тканей животных (более поздние выделения из различных книдарий, спиртовые фиксации, хранение в течение 2-3 дней при -20) согласно приведенному протоколу со стандартными праймерами к участку 1 субьединицы цитохромкосидазы HCO2198/LCO1490.
Обозначения: LD – маркер длин ДНК, Tia - Tiaropsis sp., Cor – Cordylopora caspia, Sib - Siboglinium sp., Gal - Galathealinum sp., Cot – Cotylorhiza sp., Lin – Linuche sp., Mas – Mastigias sp., K- отрицательный контроль.
Выделение ДНК из экскрементов северного оленя набором D-soils-5
1)Использовано 3 образца, собранные весной 2016 года. До проведения экстракции ДНК хранились при -21 C. Ранее из этих образцов уже была выделена ДНК и успешна проведена амплификация 16 микросателлитных локусов.
2) От каждого образца взята навеска по 230 г и 440 г.
3) Все этапы выделения шли в соответствии с протоколом
а) Объем смеси после добавления буфера SB, где была навеска 440 г, составил примерно 1,2 мл; где 230 г- 0,9 мл.
б) До добавления к супернатанту 150 мкл буфера PB, объем перенесенной смеси составил примерно 500 мкл.
образцы после внесения буфера PB
в) После центрифугирования супернатанта, объем перенесенной в новую пробирку смеси составил 550-600 мкл, к нему добавлен буфер BB 600 мкл.
г) Объем элюции ДНК во всех образцах 100 мкл, раствор был прозрачный.
Дополнительной очистки ДНК не проводилось.
Далее выполнена ПЦР с набором CorDis Rangifer в объеме 12,5 мкл для каждого образца, из которых 4 мкл ДНК, 1 мкл воды, 5 мкл реакционная смесь и 2,5 мкл раствор активатора.
Визуализация полученных ПЦР-продуктов проведена на одноканальном генетическом анализаторе Qsep1-Plus от фирмы Bioptic, использовано 10 мкл раствора ПЦР-продукта.
Результаты фореза:
Представлены аллели 16 микросателлитных локусов без разделения по 4 каналам.
Во всех образцах наблюдались алелли, длиной от 111 до 445 п.н.
Образец №1 навеска 230 г
Образец №1 навеска 440 г
Образец №2 навеска 230 г
Образец №2 навеска 440 г
Образец №3 навеска 230 г
Образец №3 навеска 440 г
Набор для выделения геномной ДНК
Метод позволяет получать чистую геномную ДНК для ПЦР и других молекулярно-генетических исследований. Значения оптической плотности стабильно находятся в диапазоне 1.8-2.0. Набор рассчитан на выделения из различных биологических материалов, что очень удобно при работе по разным клиническим направлениям. Инструкция подробная и доступная.
Даёт очень чёткие и яркие полосы даже при небольшом количестве маркера на геле. Диапазон от 50 до 1500 п.н. покрывает большинство наших повседневных задач, а равномерное распределение фрагментов (особенно в области 500-1000 п.н.) делает оценку размера невероятно удобной. После нескольких запусков могу уверенно сказать: это один из самых качественных маркеров, что попадали мне в руки.
В нашей лаборатории длительное время стояла задача подбора оптимального метода выделения РНК из сложных тканей, который сочетал бы экономическую доступность, удобство в работе и стабильно высокое качество получаемых препаратов. После тестирования различных коммерческих решений мы были вынуждены использовать аналог TRIzol, несмотря на его технологические неудобства, поскольку альтернативные наборы либо отличались высокой стоимостью и длительными сроками поставки, либо не обеспечивали достаточного качества выделенной нуклеиновой кислоты.
Обратившись в компанию "Биолабмикс", мы получили квалифицированную консультацию по подбору оптимальных решений для наших задач.
Результаты тестирования:
Наборы LRU (колоночный метод) и LR (метод осаждения)
Биоматериал: свежезамороженные образцы мышечной ткани и жабр зеркального карпа
Набор "ЛИРА" продемонстрировал исключительную эффективность выделения с минимальной контаминацией ДНК (результаты подтверждены ОТ-ПЦР в реальном времени).
Колоночный формат (LRU) вообще супер все быстро и технологично получается
Наборы RUplus и Rplants)
Исследуемые образцы: аналогичные
Данные наборы превысили все наши ожидания по выходу конечного продукта
Промо-набор БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2x) также оказался удобным в использовании для оператора, поскольку ПЦР-смесь уже содержит все необходимое для проведения реакции. Чувствительность данного набора не уступает аналогам отечественных и европейских фирм.
Кроме этого, мы протестировали ДНК маркер Step50 plus, который рекомендуется в качестве стандарта для оценки длины и количества двуцепочечных молекул ДНК размером от 50 до 1500 п.н. в агарозном геле. Преимуществом является то, что ДНК маркеры от фирмы Biolabmix поставляются готовыми к использованию и нет необходимости смешивать раствор маркера с буфером нанесения. По нашим оценкам, качество маркера ДНК маркер Step50 plus не уступает аналогичному маркеру от <американского производителя>.
Мы остались довольны качеством реактивов и надеемся на дальнейшее сотрудничество.
Опробовали с коллегами набор для выделения РНК, ДНК и белков «ЛИРА» для выделения РНК из биоптантов мозга мыши. Несмотря на слабую гомогенизацию биоматериала, последующая флуориметрия продемонстрировала концентрацию достаточную для последующего проведения ОТ-ПЦР.
Спектрофотометрический анализ выявил высокую чистоту экстрагированной НК. Мы с коллегами остались довольны качеством реактивов из промо-набора. Планируем опробовать данный набор на крови и плазме крови млекопитающих, т.к. чаще всего работаем с этим биоматериалом.
Выделение РНК из плазмы и цельной крови также было опробовано наборами «RUplus» и NAmagp100. Наборы позволяют быстро выделить НК из биоматериала, что является несомненным плюсом. Флуориметрия показала достаточные для дальнейшего анализа концентрации. Дополнительно мы провели анализ на дцДНК, и, несмотря на то, что мы не использовали ДНКазы при экстракции РНК, флуориметрический анализ не продемонстрировал дц- и оцДНК в пробе в пределах обнаружения.
Также из промо-набора нам достался DU-10 для выделения ДНК, который мы проверили на клетках крови человека. Последующее генотипирование с наборами на snp /название скрыто/ было проведено успешно, что является в том числе и хорошим результатом экстракции ДНК.
В целом, продукцией компании «Биолабмикс» мы остались довольны, мы являемся их частыми клиентами, в частности, пользуемся наборами для проведения ПЦР в реальном времени и синтезом олигонуклеотидов. В дальнейшем планируем приобрести полноценные наборы для экстракции НК для проведения последующих экспериментов.
В первую очередь, хотим выразить благодарность коллективу Биолабмикс за высокое качество предлагаемых продуктов. Мы используем описанные наборы более года и не имеем нареканий по их качеству.
Ранее у нас возникали трудности с выделением ДНК из агарозного геля и реакционных смесей от /название скрыто/, что проявлялось в нестабильности результатов выделения и потере материала в диапазоне от 40 до 80%. Однако, с использованием набора N-Gel-50-micro, мы смогли снизить потери до 10-15%, что значительно оптимизировало наши рабочие процессы.
Набор БиоМастер LR HS-ПЦР-Color (2x) также оказался высокочувствительным, что было подтверждено сравнением с другими наборами /названия скрыты/. Только LR HS-ПЦР-Color (2x) продемонстрировал достаточный уровень чувствительности для создания тест-системы клеток эукариот.
Особо отмечаем удобство данного набора: он уже содержит все необходимое для проведения реакции, требуется лишь добавить воду, праймеры и матрицу. После завершения ПЦР можно сразу приступать к электрофорезу, что позволяет сэкономить время, особенно при проведении масштабных экспериментов, требующих выполнения сотен реакций в день.
Мы начали использовать продукцию компании Биолабмикс в наших исследованиях по направлению «Идентификация микроорганизмов молекулярно-генетическими методами» в июне 2024 года. И очень довольны качеством этой продукции!
При проведении классической ПЦР с использованием набора БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2×) мы получили очень хорошие, воспроизводимые результаты.
Смесь хорошо подобрана для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c “горячим стартом”. Добавки, входящие в состав смеси, повышали время процессивности молекул HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Реакционная смесь БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2×) была химически стабильна, инертна, не меняла оптимальной температуры отжига. ДНК-полимераза, входящая в состав набора БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2×), была неактивна при комнатной температуре. Она активировалась при прогреве реакционной смеси при 95 °С в течение 5 мин. Использованная форма набора для проведения ПЦР значительно экономила время и снижала вероятность контаминации за счет уменьшения шагов пипетирования. Добавленные красители и повышенная вязкость раствора позволяли наносить реакционную смесь сразу на гель.
При проведении гель-электрофореза в качестве маркеров молекулярных масс ДНК использовали ДНК маркер Step 100 Long производства компании Биолабмикс.
ДНК маркер Step100 Long хороший стандарт для оценки длины и количества двуцепочечных молекул ДНК размером от 100 до 3000 п.н. в агарозном геле. ДНК маркер состоит из 14 фрагментов ДНК: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000 и 3000 п.н. Фрагменты длиной 500 и 1500 п.н. имеют удвоенную концентрацию.
Привлекательностью ДНК маркера Step100 Long для нас являлось, что он был готов к непосредственному использованию, поскольку в буфере для хранения содержалось 12.5% глицерина, 0.008% бромфенолового синего и 0.008% ксиленцианола. Отпадала необходимость смешивать раствор маркера с буфером нанесения.
Визуализировали ДНК-бэнды маркера в агарозном геле используя окрашивание бромистым этидием.
Использование вышеуказанных продуктов компании Биолабмикс полностью удовлетворило наши ожидания. Поскольку был конец учебного года, мы ещё не успели применить другие продукты компании Биолабмикс.
На дорожках:М - ДНК маркера Step100 Long, 6 мкл на каждую дорожку.
2 – 6 продукты амплификации размером примерно 1160 п.о., полученные с использованием набора БиоМастер HS-Taq ПЦР-Color (2×) компании Биолабмикс.
7 – продукт амплификации размером примерно 1160 п.о., полученный с использованием приготовленной в нашей лаборатории реакционной смеси, содержащей Hot Start Taq ДНК полимеразу и все дополнительно необходимые компоненты для проведения ПЦР: смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов; ПЦР-буфер; Mg2+; те-же праймеры и матричная ДНК (те-же концентрации).
Все образцы ампликонов получены с использованием одного и того же протокола ПЦР.
Если честно, не возлагали больших надежд на набор для выделения ДНК, так как он под растения, а мы решили пробовать на грибах, потому что у нас с ними обычно проблемы. И были приятно удивлены, что он отлично справился. Сравнивали с набором от Qiagen, с которым мы сейчас работаем. В итоге у D-plants выход ДНК выше (коллеги говорят, что почти в два раза), показатели качества на спектрофотометре лучше, и на форезе хорошо все выглядит.
ДНК маркеры в целом хорошие, линейка совпадает с маркерами других производителей. Было бы лучше, если бы полосы были более четкие. Маркер S-8000 больше подходит под нашу работу. Остальные видно, что по размерам все корректно, но разгоняются в геле хуже. Но возможно, что под эти маркеры не совсем подходят условия, которые мы используем для фореза.
Очень приятно, что хорошие реактивы отечественного производства теперь доступны по адекватной цене и с оперативной доставкой. Желаем процветания и надеемся на сотрудничество!
С благодарностью, сотрудники лаборатории фотобиологии Института бифизики СО РАН, Красноярск.
ДНК выделяли из биопсии хвоста и уха мыши для генотипирования. После чего использовали скринмикс с зелёным красителем. Очень удобно, так как пробы после ПЦР можно сразу наносить на гель без дополнительных операций по добавлению электрофорезного буфера для нанесения проб. Полимераза в скринмиксе также сработала замечательно - не было неспецифичных полос.
Обратная транскрипция и ПЦР в реальном времени тоже прошли без нареканий.
Данные наборы в полном составе наш институт заказал у Вас в конце года, и мы уже активно ими пользуемся. В дальнейшем планируем закупать их у Вас на постоянной основе.